周密的實(shí)驗(yàn)設(shè)置方案，以及成像前對(duì)細(xì)胞的優(yōu)化、可重復(fù)的處理，是顯微鏡實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。為此，必須考慮幾個(gè)因素，這些因素取決于顯微鏡方法和所使用的一般設(shè)置。那么，實(shí)驗(yàn)方案的關(guān)鍵問(wèn)題是什么？

　　*如何為您的實(shí)驗(yàn)和顯微鏡技術(shù)選擇應(yīng)用幾何形狀的實(shí)驗(yàn)器皿？

　　存在多種細(xì)胞培養(yǎng)容器以滿(mǎn)足不同細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定的復(fù)雜性，例如使用懸浮或粘附細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)、2D或3D測(cè)定、單培養(yǎng)或共培養(yǎng)測(cè)定等等。主要培養(yǎng)容器的幾何形狀（如生長(zhǎng)面積和體積）是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果和解釋的重要因素，在開(kāi)始之前應(yīng)仔細(xì)考慮。此外，容器幾何形狀影響實(shí)驗(yàn)中的物理（例如蒸發(fā)）和光學(xué)（例如彎液面效應(yīng)）特性。

　　ibidi的解決方案

　　ibidi提供各種幾何形狀的成像小室

　　*您為您的特定細(xì)胞類(lèi)型和顯微鏡方法選擇了合適的基底、表面和涂層了嗎？

　　細(xì)胞的培養(yǎng)、生長(zhǎng)、發(fā)育和信號(hào)傳導(dǎo)強(qiáng)烈依賴(lài)于用于細(xì)胞培養(yǎng)的表面。此外，光學(xué)規(guī)格要求強(qiáng)烈決定了哪種基底是可取的。硼硅酸鹽玻璃被廣泛用作基底，然而，涂層可能是支持細(xì)胞粘附所必需。然而，如果細(xì)胞表面需要特定的細(xì)胞外基質(zhì)，則可以使用涂層，例如膠原I、膠原IV或聚-L-賴(lài)氨酸。對(duì)于懸浮細(xì)胞或球體培養(yǎng)，則應(yīng)使用非粘附表面，如ibidi Bioinert生物惰性表面。此外，還需要考慮是進(jìn)行2D還是3D實(shí)驗(yàn)。

　　ibidi的解決方案　　

　　ibidi µ-Slides, µ-Dishes, and µ-Plates的突出特點(diǎn)是其超薄的蓋玻片底部，非常適合顯微鏡應(yīng)用。ibidi提供 ibidi Polymer Coverslip聚合物塑料底和ibidi Glass Coverslip玻璃底的實(shí)驗(yàn)器皿；也提供具有各種表面和涂層的成像小室，例如用于直接培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的ibiTreat (tissue culture-treated) ibiTreat（組織培養(yǎng)處理的）表面。

　　Non-Adherent Bioinert Surface非貼壁生物惰性表面是一種穩(wěn)定、生物惰性的表面，用于在沒(méi)有任何細(xì)胞或生物分子粘附的非粘附表面上對(duì)類(lèi)器官、球體和懸浮細(xì)胞進(jìn)行長(zhǎng)期培養(yǎng)和高分辨率顯微鏡觀(guān)察。目前有 µ-Dish?35mm, high?Bioinert?！　?/p>

　　ibidi µ-Patterning technology實(shí)現(xiàn)了各種2D和3D細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用的空間定義的細(xì)胞粘附。小型化的粘合劑圖案（例如，線(xiàn)、正方形或點(diǎn)）不可逆地印刷在ibidi Polymer Coverslip的非粘性生物惰性表面上，從而實(shí)現(xiàn)精確控制的細(xì)胞粘附。　　

　　*您能確保細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中以及整個(gè)成像過(guò)程中都是健康的嗎？

　　顯微鏡可以做活細(xì)胞和固定細(xì)胞，這取決于實(shí)驗(yàn)設(shè)置和所需的讀數(shù)。因此，任何成像實(shí)驗(yàn)都只能使用有活力和健康的細(xì)胞。為了確保這一點(diǎn)，應(yīng)每天在顯微鏡下控制細(xì)胞附著、形態(tài)、融合、營(yíng)養(yǎng)供應(yīng)和污染跡象。此外，一些參數(shù)，如溫度和濕度，必須保持一致?！　?/p>

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　　許多顯微鏡技術(shù)，如相位對(duì)比、寬場(chǎng)熒光和共聚焦顯微鏡，都可以不受限制地使用任何具有ibidi Polymer Coverslip聚合物塑料底和ibidi Glass Coverslip玻璃底的ibidi實(shí)驗(yàn)器皿?！　?/p>

　　*當(dāng)計(jì)劃一個(gè)活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)時(shí)，您的設(shè)置是否滿(mǎn)足所有必要的要求？

　　如果連續(xù)或在特定時(shí)間點(diǎn)需要多個(gè)圖像，那么活細(xì)胞成像可能是您的較佳選擇。為了在活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)中保持細(xì)胞的存活和健康，須在顯微鏡上建立和維持生理?xiàng)l件—與培養(yǎng)箱內(nèi)的設(shè)置相同。

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　　ibidi Stage Top Incubation Systems 孵育系統(tǒng)可用于載玻片/培養(yǎng)皿和多孔板。它允許在任何倒置顯微鏡上進(jìn)行短期和長(zhǎng)期分析期間準(zhǔn)確可靠地控制重要的活細(xì)胞成像參數(shù)。如果需要額外控制氧氣水平，ibidi Stage Top Incubation Systems, CO2/O2 孵育系統(tǒng)是理想的解決方案。